文献类型： 中文期刊
作者： 奉宝兵 1 ; 魏祥进 1 ; 焦桂爱 1 ; 胡时开 1 ; 邬亚文 1 ; 谢黎虹 1 ; 圣忠华 1 ; 邵高能 1 ; 唐绍清 1 ;
作者机构： 1.中国水稻研究所/农业部水稻生物学与遗传育种重点实验室/水稻生物学国家重点实验室
关键词： 水稻;基因编辑;CRISPR/Cas9;PUL;千粒重
期刊名称： 中国稻米
ISSN： 1006-8082
年卷期： 2019 年 005 期
页码： 99-104,107
摘要： 利用CRISPR/Cas9技术对调控稻米脱支酶基因PUL定点编辑,获得了具有重要育种价值的PUL等位变异.首先设计2个guide RNA(gRNA)靶位点,构建OsPUL,基因定点编辑载体pC1300-Cas9.然后利用农杆菌介导侵染水稻材料中花11,提取T0代转基因植株的基因组DNA,并对编辑位点附近的DNA片段进行PCR检测及测序分析.结果表明,T0代材料中PUL的突变频率高达90%,其中纯合缺失突变率约占51%.对T1代纯合缺失突变体的千粒重性状的调查分析结果表明,部分pul的缺失突变能显著提高千粒重(大于5%).通过RT-PCR分析T0代突变体中相关基因表达表明,目的基因PUL、支链淀粉相关基因和粒重负调控相关基因(GS3和GW8)表达降低,而粒重正调控相关基因(GL7)表达增加.不同类型pul突变体的成功创建丰富了PUL的变异类型,为水稻遗传改良提供了重要的遗传材料.
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