文献类型： 中文期刊
作者： 孟庆玲 1 ; 乔军 1 ; 才学鹏 1 ; 田广孚 1 ; 闫鸿斌 1 ; 骆学农 1 ;
作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室
关键词： 斯氏艾美耳球虫;MIC-5;兔IL-15;共表达
期刊名称： 中国农业科学
ISSN： 0578-1752
年卷期： 2011 年 44 卷 19 期
页码： 4096-4101
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 【目的】构建能在真核细胞中共表达斯氏艾美耳球虫微线蛋白5(MIC-5)和兔IL-15重组载体,为进一步研究抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗奠定基础。【方法】将斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因,克隆到真核双表达载体pBudce4.1中,应用脂质体介导法将构建的重组质粒pB-MIC-5-IL-15转染BHK-21细胞。在转染后,用RT-PCR法和间接免疫荧光试验(IFA)分别检测MIC-5和IL-15基因在BHK-21细胞中的转录和表达情况。【结果】在重组质粒pB-MIC-5-IL-15转染BHK-21细胞24 h后即可检测到MIC-5、IL-15基因进行了转录;在转染36、48、72h后,MIC-5和IL-15基因可同时在BHK-21细胞中表达。【结论】成功构建了含有斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因的重组载体,实现了两种基因在真核细胞中的共表达,为抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗研制奠定了基础。
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