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套式PCR检测奶牛粪便中隐孢子虫

文献类型： 中文期刊

作者： 王权 1 ; 周金林 1 ; 钱应娟 1 ; 陈永军 1 ; 张惠英 1 ; 周勇志 1 ; 王永康 2 ; 徐新红 2 ;

作者机构： 1.中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所

2.上海市畜牧兽医站

关键词： 套式PCR;隐孢子虫;粪便

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2002 年 33 卷 06 期

页码： 582-584

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了检测样品中的微量隐孢子虫 ,从含有不同数量隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中 ,直接提取DNA用作初始PCR(Initial PCR)模板 ,以稀释的初始PCR的产物为模板进行套式PCR(Nested PCR) ,用两对人工合成寡核苷酸分别作为两PCR的引物 ,扩增大小分别为 540pb、2 58pb的特异片段。PCR产物经电泳鉴定 ,可从阳性粪便标本DNA抽提物中扩增出目的片段 ,而阴性对照不能扩增目的片段 ;初始PCR、套式PCR的敏感小生最低可分别检测到含卵囊1 0 0、5个 /g粪便。初步应用结果表明某奶牛场的奶牛自然感染率为 1 6 4%。试验表明套式PCR的敏感性比普通PCR约高 1 0 0倍 ,能用于奶牛隐孢子虫感染情况的调查

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