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水稻叶绿体表达体系的建立及抗PPT叶绿体转化植株的获得

文献类型： 中文期刊

作者： 李轶女 1 ; 孙丙耀 2 ; 苏宁 3 ; 孟祥勋 2 ; 张志芳 1 ; 沈桂芳 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院生物技术研究所

2.苏州大学生命科学学院

3.中国农业科学院作物科学研究所

关键词： 水稻;同源片段;bar基因;叶绿体转化

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2007 年 40 卷 09 期

页码： 1849-1855

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立外源基因在水稻叶绿体中的表达体系。【方法】通过分析已公布的水稻叶绿体基因组全序列及其基因分布特点,选择ndhF与trnL的基因间序列作为除草剂PPT抗性基因bar定点整合的位点。以水稻叶绿体基因组DNA为模板,采用PCR方法克隆了两个适于水稻叶绿体基因组遗传转化的同源片段,构建了含水稻叶绿体16S高效表达启动子、外源基因bar、psbA基因的3′序列(终止子)以及两个同源片段的水稻叶绿体特异表达载体pRB。【结果】采用基因枪法转化水稻品种中花10号幼穗诱导的愈伤组织,并再生植株,获得转化体后代种子。对转化植株进行的分子检测结果表明,外源基因bar可能被整合到水稻叶绿体基因组中。后代种子的遗传学分析显示,外源基因bar可正常表达并遗传。【结论】利用所建立的水稻叶绿体外源基因表达体系,外源基因bar既可在水稻叶绿体基因组中正常表达,还可作为转化体筛选时的除草剂抗性选择标记。

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