文献类型： 中文期刊
作者： 郭秀霞 1 ; 李灵芝 1 ; 马太光 1 ; 雷逢进 2 ; 张瑞腾 1 ; 李海平 1 ;
作者机构： 1.山西农业大学园艺学院
2.山西省农业科学院棉花研究所
关键词： 西葫芦;ISSR-PCR;正交设计;引物筛选
期刊名称： 山西农业科学
ISSN： 1002-2481
年卷期： 2017 年 45 卷 03 期
页码： 325-327+331
摘要： 为了确定西葫芦ISSR-PCR的最佳反应体系,以西葫芦基因组DNA为模板,采用正交试验方法,对模板DNA、引物及2×Taq PCR Master Mix的用量进行了优化,并通过梯度PCR确定不同引物的最佳退火温度。结果表明,最佳反应体系为:在20μL的体系中,模板DNA(50 ng/μL)1 L,引物(10μmol/L)3 L,Master Mix 10μL;利用该体系从50条ISSR引物中筛选出18条扩增条带清晰、多态性好的引物。这一体系的建立及引物筛选为以后利用ISSR分子标记技术对西葫芦进行研究提供了科学依据。
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