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口蹄疫病毒氨基酸改造对其病毒样颗粒稳定性的影响

文献类型: 中文期刊

作者: 李璐莹 1 ; 董虎 1 ; 卢渊录 1 ; 王苗苗 1 ; 孙世琪 1 ; 郭慧琛 2 ;

作者机构: 1.国家口蹄疫参考实验室

2.中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室

关键词: 病毒样颗粒;三维构象;突变体;稳定性;同源建模;口蹄疫病毒

期刊名称: 生物工程学报

ISSN: 1000-3061

年卷期: 2021 年 007 期

页码: 2435-2442

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 病毒样颗粒(Viruslikeparticles,VLPs)的稳定性是目前影响口蹄疫VLPs疫苗质量的主要因素。为进一步提升口蹄疫VLPs疫苗的质量,基于口蹄疫病毒三维空间结构,通过动力学分析软件设计并筛选出3个氨基酸改造位点。经点突变试剂盒成功制备出上述3种突变型重组质粒,转化大肠杆菌Escherichia coli BL21菌株后经体外诱导表达,Ni离子层析柱纯化后,SDS-PAGE结果证明3种氨基酸突变不影响目标蛋白的表达。体外组装获得的3种突变型VLPs稳定性研究结果发现,内部疏水性侧链氨基酸的引入使VLPs的形态变得更加均一(N4017W),且其稳定性比其他两种VLPs明显提高。结果表明,衣壳内部疏水性作用力有助于VLPs的形成且有助于维持衣壳的稳定性,为提高VLPs疫苗质量提供了新的研究思路,有助于推进VLPs疫苗的发展。

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