文献类型： 中文期刊

作者： 巩元勇 ¹ ; 赵丽华 ¹ ; 闫飞 ¹ ; 郭书巧 ² ; 束红梅 ² ; 倪万潮 ² ;

作者机构： 1.攀枝花学院生物与化学工程学院

2.江苏省农业科学院经济作物研究所

关键词： 琉璃苣;BoD6D;γ-亚麻酸;酵母表达载体;植物表达载体

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2021 年 003 期

页码： 227-232

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 运用植物基因工程手段构建琉璃苣BoD6D转化载体,为提高油料作物油份中γ-亚麻酸含量奠定基础。以琉璃苣基因组DNA为模板克隆BoD6D,构建酵母表达载体并转化酿酒酵母,对酵母进行诱导表达,提取脂肪酸后进行甲酯化反应,利用气相色谱分析脂肪酸含量;同时构建植物双元表达载体,经农杆菌介导通过蘸花法转化拟南芥,最后对转基因拟南芥通过抗性筛选及PCR进行鉴定。结果表明,BoD6D编码区不含有内含子,可以直接用于后续的功能研究;成功构建了酿酒酵母表达载体pYES2-BoD6D,气相色谱检测结果表明BoD6D在酵母中能够成功的将亚油酸催化生成γ-亚麻酸;成功构建了植物双元表达载体pBI121-BoD6D,卡那霉素抗性筛选和PCR鉴定结果表明已经成功获得BoD6D的拟南芥转化植株。通过以琉璃苣基因组DNA为模板比较方便的获得有功能的BoD6D用于转基因植物研究。