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检测猪鼻支原体抗原的ELISA方法的建立及其应用

文献类型： 中文期刊

作者： 朱红振 1 ; 危艳武 1 ; 黄立平 1 ; 刘丹 1 ; 夏德利 1 ; 吴洪丽 1 ; 边海桥 1 ; 冯力 1 ; 刘长明 1 ;

作者机构： 1.兽医生物技术国家重点实验室

关键词： 猪鼻支原体;单克隆抗体;抗原检测;ELISA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2019 年 007 期

页码： 828-833

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立检测猪鼻支原体(Mhr)抗原的ELISA方法,本研究采用杂交瘤技术制备了抗Mhr菌体的特异性单克隆抗体(MAb),经亲和层析纯化后标记辣根过氧化物酶(HRP),建立了一种能够检测Mhr抗原的ELISA方法.ELISA反应条件优化结果为:HRP标记的MAb最适稀释度为1∶1 000,该方法的批内和批间变异系数均小于6%,经超声波处理Mhr抗原效果更佳,最低抗原检出量为25 ng.用该方法对已知猪肺炎支原体(Mhp)、猪圆环病毒2型(PCV2)抗原检测无交叉反应.本研究建立的检测Mhr抗原的ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可为Mhr体外培养物抗原定量检测提供可靠的技术手段.

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