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牛白血病病毒P24蛋白单克隆抗体的制备与表位鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 于长清 1 ; 周玉龙 2 ; 徐青元 1 ; 先元华 3 ;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控国家重点实验室

2.黑龙江八一农垦大学动物科技学院

3.宜宾职业技术学院现代农业学院农业生物安全评价与技术工程中心

关键词： 牛白血病病毒;单克隆抗体;P24蛋白

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2024 年 46 卷 010 期

页码： 1080-1085

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备牛白血病病毒（BLV）P24蛋白单克隆抗体（MAb），本研究分别将原核表达载体pcoldIII-P24-GST和p ET-32a-P24-6×His转染大肠杆菌感受态细胞后诱导表达并分别采用纯化磁珠和Ni-柱纯化带有His和GST标签的两种重组P24蛋白（rP24-His和r P24-GST）。将rP24-His作为免疫原免疫小鼠，制备针对P24蛋白的MAb，利用rP24-GST作为包被抗原，经ELISA方法筛选，结果显示获得并筛选到两株针对P24蛋白效价较高的MAb44-10和115-5。间接免疫荧光试验检测结果显示，两株MAb仅和P24蛋白反应，均不能与牛病毒性腹泻病毒反应，初步表明其特异性良好。将P24蛋白截短表达后进行抗原表位鉴定，结果显示，两株MAb 44-10和115-5分别识别P24蛋白氨基酸序列197GQKLQACAHW206和108GDLRSQYQN116。本研究获得的两株P24 MAb具有建立BLV血清学检测方法的潜力，为进一步研发针对P24蛋白的BLV检测方法奠定了基础。

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