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牛疱疹病毒1型糖蛋白E(gE)可溶性表达及其反应原性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 杨晨 1 ; 孙续 1 ; 丁学智 1 ; 杨峰 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室

关键词： 牛传染性鼻气管炎;牛疱疹病毒1型;gE蛋白;原核表达;载体构建

期刊名称： 中兽医医药杂志

ISSN： 1000-6354

年卷期： 2023 年 003 期

页码： 17-21

摘要： 为探索牛传染性鼻气管炎诊断新技术，本研究以GenBank公布的牛疱疹病毒1型（BHV1,NC＿001847.1）基因序列为参考，预测并优化了BHV1的gE蛋白胞外区密码子序列。优化后的序列长度为1 275 bp,5’端和3’端分别添加限制性酶切位点SacⅠ和HindⅢ后克隆至载体pUC19，进而构建原核表达载体pET-SUMO-gE，将其转入大肠杆菌BL21-CodonPlus（DE3）-RIL中表达重组蛋白，使用NiNTA亲和柱纯化重组蛋白。SDS-PAGE和Western blot检测结果证明，获得的牛疱疹病毒1型gE胞外区重组蛋白大小约为70 kDa，有良好的水溶性和反应原性。该研究结果为gE特异性单克隆抗体的制备及后续诊断试剂盒的研发奠定了基础。

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