3种淡水鱼病原菌多重PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 胡宗云

作者： 胡宗云;杨培民;闫有利

作者机构：

关键词： 嗜水气单胞菌;迟钝爱德华氏菌;蜡样芽孢杆菌;多重PCR

期刊名称： 水产科学

ISSN： 1003-1111

年卷期： 2022 年 41 卷 004 期

页码： 605-613

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据辽宁地区常见淡水鱼病原菌嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌、蜡样芽孢杆菌的相关毒力因子,选择特异性较强的嗜水气单胞菌的溶血素(hlyA)基因、迟钝爱德华氏菌的效应蛋白(eseD)基因、蜡样芽孢杆菌非溶血性肠毒素(nheA)基因为分子靶标,分别设计1对特异性引物,建立可同步检测3种菌的多重PCR检测体系.研究结果显示,在3个毒力基因引物浓度均为0.4μmol/L,模板质量浓度为2.5 ng/μL,dNTP和酶添加量分别为2.5μL和0.3μL,退火温度为55℃时,各目的片段均可较好地扩增.敏感性试验结果表明,建立的多重PCR对嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌和蜡样芽孢杆菌的最低检测量分别为4.8、3.0 ng和2.6 ng.对临床分离的菌株样本进行检测,与16S rDNA分子鉴定结果的符合率为100%.建立的多重PCR体系检测方法特异、灵敏、快速,可同步完成淡水鱼源的嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌和蜡样芽孢杆菌的检测.

分类号： S917.1

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