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非洲猪瘟病毒pK205R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

《畜牧与兽医 》 2025 北大核心

摘要:旨在建立可以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pK205R抗体的血清学检测方法。基于杆状病毒表达系统构建重组杆粒Bacmid-pK205R,以纯化的pK205R蛋白为包被抗原,优化各项反应条件,建立间接ELISA抗体检测方法,验证方法的特异性、灵敏性、重复性,并对临床血清样品进行检测。结果显示:pK205R蛋白可以与ASFV阳性血清发生发应,ELISA方法的抗原包被浓度为50 ng/孔,4℃过夜包被,封闭液为2%牛血清白蛋白(BSA),37℃封闭1 h,待检血清以5%脱脂乳进行1∶200稀释,37℃孵育0.5 h;二抗工作浓度为1∶5 000,37℃孵育0.5 h, 37℃下显色10 min;该方法的阳性临界值为0.186(≥0.186为阳性,<0.186为阴性),且具有良好的特异性、灵敏性、可重复性,与商品化试剂盒符合率为79.92%。本研究成功建立pK205R非洲猪瘟间接ELISA抗体检测方法,为进一步优化和研制非洲猪瘟抗体的快速检测试剂盒提供了参考。

关键词: 非洲猪瘟病毒 pK205R蛋白 间接ELISA 杆状病毒表达

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西藏日喀则地区羊梨形虫病原调查和分析

《中国兽医杂志 》 2025 北大核心

摘要:为了解我国西藏自治区日喀则市藏羊梨形虫病的流行情况,本试验采集了366份藏羊血液样品并提取基因组DNA,采用巢式PCR方法对藏羊梨形虫病病原进行检测和鉴定,并基于梨形虫18S rRNA基因序列构建系统进化树。结果显示,梨形虫阳性率为35.79%(131/366),其中绵羊泰勒虫阳性率为35.25%(129/366),环形泰勒虫阳性率为0.55%(2/366);系统进化树结果显示,该地区绵羊泰勒虫与中国新疆株(GenBank:FJ603460)、土耳其株(GenBank:AY260172)和苏丹株(GenBank:AY260171)处于同一分支;环形泰勒虫与意大利株(GenBank:MT341858)、土耳其株(GenBank:524666)和中国内蒙古株(GenBank:EU083801)处于同一分支。本试验首次报道了西藏地区存在绵羊泰勒虫,为西藏地区羊梨形虫病的流行病学调查和综合防控提供了数据参考。

关键词: 藏羊 梨形虫 巢式PCR 系统进化树 流行病学调查

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基因Ⅰ型日本脑炎病毒NS1蛋白的多克隆抗体制备及鉴定

《中国兽医科学 》 2025 北大核心 CSCD

摘要:乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由三带喙库蚊媒介传播的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)感染引起的,临床表现以神经症状为主。NS1蛋白作为JEV编码的非结构蛋白,能够诱导机体产生非中和作用的保护性抗体,是JE诊断和疫苗研发的主要靶标。本研究以基因Ⅰ型JEV的NS1蛋白为靶标,将构建的重组质粒p ET30a-His-NS1转化Rosetta(DE3)表达菌,以0.5 mmol/L IPTG诱导表达。结果显示,与预期蛋白分子量大小一致的重组NS1蛋白以包涵体形式表达。经亲和层析柱纯化获得浓度为2.568 mg/mL的重组His-NS1蛋白。免疫印迹和间接免疫荧光结果表明,制备的高效价抗NS1蛋白多克隆抗体能够特异性识别蛋白分子量分别为46和55 ku的天然NS1蛋白。此外,本研究首次发现制备的抗NS1蛋白多克隆抗体与JEV预孵育能够剂量依赖性的显著降低JEV感染BHK-21细胞的病毒产量。将抗NS1蛋白多克隆抗体作为免疫沉淀抗体,用于JEV感染PK-15细胞的免疫沉淀质谱分析。结果表明,NS1蛋白能够与囊膜E蛋白相互作用。总之,本研究为深入了解NS1蛋白的生物学功能、JE诊断方法的建立和疫苗研制提供了基础材料。

关键词: 日本脑炎病毒 NS1蛋白 多克隆抗体 制备 鉴定

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成渝地区农业多功能评价及其障碍因子诊断研究

《中国农业资源与区划 》 2025 北大核心

摘要:[目的]构建成渝地区农业多功能评价指标体系,对农业多功能进行量化分析,并从系统层、指标层探究其主要障碍因子,对实现农业整体效益最大化和促进农业现代化转型升级具有重要的指导意义。[方法]文章基于农产品供给、经济发展、社会保障和生态涵养4个维度构建了成渝地区农业多功能评价指标体系,并结合熵值法对2008—2020年成渝地区16个城市的农业多功能发展水平进行综合评价。[结果](1)从整体时间演变来看,成渝地区农业多功能发展水平处于逐步上升的态势,从2008年的0.198上升到2020年的0.436,年均增长6.26%。(2)从障碍因子识别来看,系统层障碍因子识别方面,2008—2020年各系统层平均障碍度从高到低依次为:农产品供给功能>社会保障功能>经济发展功能>生态涵养功能。(3)成渝地区在非粮供给、经济带动和就业机会三方面还存在较大短板,制约了农业多功能的发展。人均农林牧渔服务业增加值、人均水果产量和地均机械总动力3个障碍因素在2008年、2012年、2016年和2020年始终是排名前5位的障碍因素。[结论]要提升农业的非粮供给能力,优化农业生产结构;提高农业社会化服务水平,增强农业服务业就业机会与经济带动作用;提高耕地生产率与农业机械化水平,保障农业生产效率;因地施策,促进农业多功能区域均衡发展。

关键词: 成渝地区 农业多功能评价 障碍因子 时空演变 熵值法

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青海省潜叶蝇及其寄生蜂种类调查

《植物保护 》 2025 北大核心 CSCD

摘要:为明确青海省为害蔬菜的潜叶蝇及其天敌寄生蜂种类,2016年至2019年在青海省采用随机取样法调查并收集田间被潜叶蝇为害的蔬菜和杂草等的植物叶片,对羽化出来的潜叶蝇及其天敌寄生蜂进行形态鉴定。研究共发现4种潜叶蝇,包括本地种豌豆彩潜蝇Phytomyza horticola和入侵种南美斑潜蝇Liriomyza huidobrensis、美洲斑潜蝇L.sativae和番茄斑潜蝇L.bryoniae。其中豌豆彩潜蝇为害最重,其次是南美斑潜蝇。同时共调查到4种潜叶蝇的寄生蜂3科(姬小蜂科、茧蜂科和金小蜂科),共35种。其中发生数量最多的是普金姬小蜂Chrysocharis pubicornis,其次是豌豆潜蝇姬小蜂Diglyphus isaea。综上,青海省蔬菜上的潜叶蝇有加重为害趋势,在实际生产时应及时对豌豆彩潜蝇和南美斑潜蝇的发生进行预测,并制定防治措施,同时鉴于青海省潜叶蝇的寄生蜂种类较为丰富,应充分保护和利用寄生蜂资源,尤其是2种优势种寄生蜂普金姬小蜂和豌豆潜蝇姬小蜂。

关键词: 潜叶蝇 寄生蜂 入侵种 生物防治

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马铃薯疮痂病拮抗菌ZF517的分离鉴定及生防效果初步研究

《中国生物防治学报 》 2025 北大核心 CSCD

摘要:马铃薯疮痂病(potato common scab)近年来在我国主要产区广泛发生,造成严重危害,且缺乏绿色高效的防治措施。为筛选对疮痂病具有显著拮抗效果的生防菌株,本研究以疮痂链霉菌Streptomyces scabies为靶标,筛选到一株拮抗效果显著的生防菌株ZF517。通过形态学观察、生理生化特性测定以及多基因系统发育树分析,鉴定该菌株为枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis。抑菌谱分析显示,菌株ZF517对6种病原真菌和3种病原细菌具有较高的拮抗效果。生防性状检测表明,ZF517能产生蛋白酶和嗜铁素,并含有Surfactin、Macrolactin、Fengycin、Difficidin、Bacillibactin、Bacillaene、Bacilysin和Iturin的合成基因。此外,ZF517的发酵液可抑制疮痂链霉菌菌丝的生长。经萝卜幼苗法验证,ZF517发酵液可显著抑制疮痂链霉菌对萝卜幼苗的侵染,其防效达到63.94%;盆栽试验结果表明,其对马铃薯疮痂病的防效达58.07%,显著优于对照药剂20%噻唑锌悬浮剂的防治效果。综上,菌株ZF517在防治马铃薯疮痂病方面表现出较大的生防潜力。

关键词: 枯草芽胞杆菌 马铃薯疮痂病 脂肽类物质 生物防治

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绿茶中7种不同极性农药在茶汤中的浸出规律及其风险评估

《茶叶科学 》 2025 北大核心 CSCD

摘要:呋虫胺、苯醚甲环唑、唑虫酰胺、虫螨腈、联苯菊酯、丁醚脲与草甘膦等7种农药是在我国登记的在茶树上广泛使用的化学农药,是茶叶中农药残留风险评估重点监控对象。使用气相色谱和超高效液相色谱-串联质谱,监测了绿茶冲泡中7种农药的浸出率。结果发现,茶汤中农药的浸出率与水溶解度、辛醇/水分配系数相关。呋虫胺、草甘膦易溶于水,在茶汤中的平均浸出率均高于70%,其他5种农药的水溶解度较低,平均浸出率小于11.3%。不同农药在绿茶第一次冲泡和第二次冲泡时,浸出率存在较大差异,除联苯菊酯外,6种农药在第一次冲泡时的平均浸出率是第二次的0.89~2.55倍。以喷药后第10天制备的绿茶为评估对象,根据农药的毒性及人体暴露风险评估表明,饮用绿茶茶汤摄入7种残留农药对人体健康的风险较低,其累积风险商仅为4.1%。

关键词: 茶 农药 茶汤 浸出规律 风险评估

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一起鹿呼吸道综合征相关病原的分析与鉴定

《中国兽医科学 》 2025 北大核心 CSCD

摘要:2023年10月,甘肃一梅花鹿养殖场发生因鹿呼吸道疾病引起死亡的病情。为了解造成此次病情的病原,采集发病鹿的鼻腔深部棉拭子和血液样品、病死鹿组织样品,采用qPCR和RT-qPCR方法,分别对绵羊支原体、牛副流感病毒3型、牛疱疹病毒、牛冠状病毒、牛呼吸道合胞体病毒、溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、化脓隐秘杆菌8种呼吸道综合征相关病原进行检测。结果显示,共检出4种病原,其中绵羊支原体和化脓隐秘杆菌阳性各3份,多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌阳性各4份,证实该场呼吸道病情由以上4种病原混合感染引起。对病原进行分离鉴定,结果获得1株溶血性曼氏杆菌。药敏试验分析发现,该菌株对头孢吡肟、妥布霉素、卡那霉素、麦迪霉素、哌拉西林敏感,对氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻吩、头孢呋辛、头孢西叮、头孢哌酮耐药。研究结果为该鹿场呼吸道疾病防控和针对性治疗提供了参考依据。

关键词: 鹿呼吸道综合征 病原检测 混合感染 病原分离鉴定 药敏试验

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黄河上中下游水沙变化特征及其驱动因素对比分析

《中国农村水利水电 》 2025 北大核心

摘要:基于2002-2022年黄河流域上中下游3个典型水文站(兰州、龙门和利津)的降水量、径流量和输沙量数据,利用Mann-Kendall趋势检验法、Pettitt突变检验法、水沙关系曲线以及双累积曲线分析了其水沙变化特征及其驱动因素,并计算了气候变化和人类活动对径流量和输沙量变化的贡献率。结果表明:兰州水文站(汛期和非汛期)和利津水文站(非汛期)的径流量具有显著增加趋势且变化率分别为4.83、2.47和3.37亿m3/a,龙门水文站输沙量在非汛期具有显著的减小趋势且变化率为-128.01万t/a;各水文站降水量、径流量和输沙量的突变点具有一定的差异性,如汛期时兰州水文站、龙门水文站和利津水文站输沙量的突变点分别为2008年、2009年和2018年;兰州水文站(非汛期)和利津水文站(汛期和非汛期)的水沙关系拟合相对较好,其中龙门水文站(汛期)和利津水文站(非汛期)河道受径流侵蚀作用而使输沙量较大,兰州水文站(非汛期)和利津水文站(汛期)受到河道水流侵蚀能力最强;在非汛期人类活动对龙门水文站(径流量)和利津水文站(输沙量)的贡献率较大分别为94.69%和94.50%,降水对兰州水文站和龙门水文站输沙量的贡献率较大分别为99.54%和99.03%。研究成果可为黄河流域上中下游的水沙合理调控及生态环境高质量可持续发展提供一定的科学基础。

关键词: 黄河流域 水沙变化 驱动因素 趋势和突变分析 贡献率

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黄瓜抗病分子育种研究进展

《园艺学报 》 2025 北大核心 CSCD

摘要:黄瓜是中国产量最高的设施蔬菜。近年来,流行病害对黄瓜生产造成了严重影响。利用抗病分子育种技术提高选择效率、培育抗病新品种并推广应用,是防治病害最经济有效的方法,对黄瓜稳产保供和绿色生产具有重要意义。本文从抗病种质资源发掘、抗病基因/QTL定位、抗病基因克隆及分子机制解析、抗病新品种培育等方面对黄瓜抗病分子育种研究进行综述,分析了目前存在问题,并对未来工作进行展望,以期为抗病育种提供参考。

关键词: 黄瓜 抗病 分子育种 研究进展

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