文献类型: 中文期刊
作者: 宋旭 1 ; 赵永祥 1 ; 范宝超 1 ; 郭容利 1 ; 李基棕 1 ; 刘静 2 ; 李彬 1 ;
作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所
2.河北农业大学
关键词: CHO细胞系;稳定表达;仔猪腹泻病毒;慢病毒
期刊名称: 畜牧与兽医
ISSN: 0529-5130
年卷期: 2023 年 003 期
页码: 104-109
收录情况: 北大核心
摘要: 为构建稳定表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪胃肠炎病毒(TGEV)和猪Delta冠状病毒(PDCoV)主要抗原的CHO细胞系,为猪病毒性腹泻三联疫苗的研发提供基础材料,本研究将PEDV的S基因的COE区域、TGEV和PDCoV的S基因的受体结合区域(RBD),通过同源重组的方式进行融合,克隆到慢病毒表达质粒pLV-EF1a-IRES-Puro中,包装得到重组慢病毒。使用重组慢病毒感染CHO细胞,经过嘌呤霉素和单克隆细胞筛选,基因水平和蛋白水平表达验证,成功构建了稳定表达3种猪腹泻病毒抗原融合蛋白的CHO细胞系,为进一步研制PEDV-TGEV-PDCoV的亚单位疫苗奠定了基础。
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[1]犬干扰素α4在CHO细胞中的稳定表达. 王晶宇,欧阳伟,王永山,夏兴霞,诸玉梅. 2017
[2]慢病毒介导的bta-miR-222稳定过表达MDBK细胞株的构建及鉴定. 钟纯燕,主性,李基棕,毛立,李文良,郝飞,刘茂军,嵇辛勤,肖芳. 2019
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