文献类型： 中文期刊

作者： 张震 ¹ ; 李清 ² ; 徐菁 ² ; 陈凯园 ² ; 张春芝 ² ; 祝光涛 ¹ ;

作者机构： 1.云南师范大学马铃薯科学研究院

2.中国农业科学院农业基因组研究所

关键词： 马铃薯;线粒体转运信号肽;靶向表达载体;亚细胞定位;细胞质雄性不育

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2024 年 005 期

页码： 66-73

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】植物线粒体基因变异是产生细胞质雄性不育（cytoplasmic male sterility，CMS）的主要原因，利用生物技术是创造CMS不育系的重要手段。通过比较启动子、线粒体转运信号肽（mitochondrial targeting signal peptides，MTS）的不同组合对下游eGFP的表达强弱，来探究最佳马铃薯线粒体靶向表达载体。【方法】选择3个启动子AtUBI10、StUBI10、2×35S和两个线粒体转运信号肽ATPγ与Rf1b进行试验，利用烟草叶片瞬时表达系统和PEG介导马铃薯原生质体转化体系进行靶向载体的表达验证。【结果】六个线粒体靶向表达载体中AtUBI10::ATPγ-eGFP在烟草瞬时表达效果最佳，可准确定位到线粒体，其次为StUBI10::ATPγ-eGFP和2×35S::ATPγ-eGFP；在马铃薯原生质体中载体AtUBI10::ATPγ-eGFP有最佳的表达效果，与烟草中表达结果一致，其次是StUBI10::Rf1b-eGFP和AtUBI10::Rf1b-eGFP，而2×35S启动子的两个载体在原生质体均表达较弱。【结论】启动子AtUBI10与线粒体转运信号肽ATPγ所构建的靶向线粒体载体为最佳组合，可用于马铃薯线粒体基因的相关研究中。