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马属抗菌肽hepcidin在酵母系统中的表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 宋楠 1 ; 吴培星 2 ; 张继瑜 2 ; 徐玲 3 ; 孙茜胜 3 ; 李纯玲 4 ; 伏小平 1 ;

作者机构： 1.甘肃农业大学动物医学院

2.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

3.北京养元兽药有限公司

4.北京天之泰生物科技有限公司

关键词： 抗菌肽hepcidin;毕赤酵母;表达

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2011 年 46 卷 01 期

页码： 11-15+19

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank上马属抗菌肽hepcidin的氨基酸序列,设计并合成全长279bp的hepcidin基因,将该基因插入pPICZαA中构建真核表达载体,PCR鉴定的阳性质粒电转化毕赤酵母菌X-33,用不同浓度Zeocin筛选高拷贝阳性重组菌,甲醇诱导表达,表达上清液经超滤膜纯化后,利用SDS-PAGE电泳和抑菌试验进行鉴定.结果表明:PCR检测和基因测序表明hepcidin基因合成正确,成功构建真核表达载体pPICZαA-hepcidin;SDS-PAGE电泳显示,诱导表达hepcidin蛋白分子质量约10ku,超滤纯化后蛋白浓度达177.8mg·L-1;抑菌结果表明,该表达产物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、无乳链球菌均有较好的抗菌活性.

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