文献类型： 中文期刊
作者： 杨勃 1 ; 兰喜 2 ; 杨彬 3 ; 柳纪省 4 ; 单兴娜 5 ;
作者机构： 1.甘肃农业大学
2.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室
3.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室
4.中国农业科学院兰州兽医研究所
5.中国农业科学院
关键词： 猪;札幌病毒;衣壳蛋白;原核表达
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2014 年 12 期
页码： 1273-1278
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为获得猪源札幌病毒(SaV)衣壳蛋白(VP1),以SaV CH430株的RNA为模板,采用RT-PCR扩增VP1基因;将其克隆到原核表达载体pET-30a中,并将成功构建的原核表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。结果显示,获得的VP1基因全长为1 635bp,编码545个氨基酸。SDS-PAGE结果显示,目的条带大小为63ku,与预期结果相符。重组菌在37℃、IPTG终浓度为0.8mmol/L、诱导表达6h时重组蛋白的表达量达到最大值,表达的目的蛋白主要以包涵体的形式存在。将纯化的VP1重组蛋白免疫家兔,得到了超免疫血清。Western-blot分析表明,该重组蛋白与超免疫血清具有良好的反应原性。上述试验结果为深入研究VP1蛋白的功能和研制ELISA诊断试剂盒奠定了基础。
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