文献类型： 中文期刊

作者： 韩梦荞 ¹ ; 吴疆 ² ; 李丽华 ² ; 王昭懿 ² ; 邓习 ² ; 韦凤杰 ² ; 任民 ² ; 孙洋洋 ² ; 李富欣 ² ;

作者机构： 1.中国农业科学院烟草研究所

2.null

关键词： 烟草;染色体制备;酶解法;种质资源;染色体工程

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2025 年 41 卷 003 期

页码： 44-50

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】开发一套适合烟草的染色体制备体系，为推进烟草染色体工程以及远缘杂交研究的系统开展奠定基础。【方法】以普通烟草为供试材料，利用酶解法进行染色体制备体系的构建。试验针对根尖组织8个时间段进行采样；利用4种方法进行预处理，包括对照（前期无任何处理）、20%风油精室温处理2 h、冰水混合物0℃处理48 h以及N₂O处理，其中，N₂O处理又分为20–70 min每间隔10 min取一次样；根尖样品分别在35、45和55 min不同时间下进行酶解。对每种处理方法或时长均进行了染色体制备并观察，根据染色体长度、清晰度及分散程度鉴定烟草染色体制备最佳方法。整合优化后的处理方法和时长，形成烟草染色体制备方法，并通过制备不同类型烟草品种的染色体样品进行体系的适用性验证。【结果】10∶30–12∶30为烟草根尖取样的理想时间，N₂O预处理30–40 min，酶解45 min较为适宜，并利用该优化体系应用于普通烟草祖先种、普通烟草、远缘杂交衍生后代3个不同种质资源，均获得高质量染色体样品。【结论】建立了适用于烟草染色体的制备体系。利用该体系可在3 h内完成从烟草根尖取样到制备出合格的染色体样品。