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油菜基因BnWRI1的克隆及RNAi对种子含油量的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 柴国华 1 ; 白泽涛 1 ; 蔡丽 1 ; 郭学兰 1 ; 张学江 1 ; 石磊 1 ; 董彩华 1 ; 刘胜毅 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院油料作物研究所/农业部油料作物遗传改良重点实验室

关键词： 油菜;含油量;WRI1基因;花粉管通道法;RNAi

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2009 年 42 卷 05 期

页码： 1512-1518

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】阐明油菜基因BnWRI1对其种子含油量的影响。【方法】采用RT-PCR技术从油菜中克隆到BnWRI1基因编码区内384bp的片段,将该片段正反向插入干扰载体pGΩ4ARi中,构建成RNAi表达载体pGΩ4ARi-WRI1,通过花粉管通道法将其转入油菜受体品种中双9号中,【结果】获得3棵转基因植株,PCR扩增和基因组Southern杂交证实外源片段已整合在受体油菜基因组中。利用半定量RT-PCR和改进的索氏提取法分别检测转基因T1代植株的BnWRI1基因表达量和种子含油量,结果表明:与非转基因对照相比,转基因植株的BnWRI1基因均受抑制,种子含油量有所降低。【结论】采用RNAi技术可使油菜内源基因BnWRI1沉默,表明油菜基因BnWRI1能有效调控种子含油量。

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