文献类型： 中文期刊
作者： 张生英 1 ; 刘仲藜 1 ; 郭爱疆 1 ; 王帅 1 ;
作者机构： 1.家畜疫病病原生物学国家重点实验室
关键词： 蛋白酶抑制剂;多房棘球蚴;DNA损伤诱导样蛋白;酶活性;抑制率
期刊名称： 畜牧兽医学报
ISSN： 0366-6964
年卷期： 2024 年 005 期
页码： 2273-2280
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 目前，多房棘球蚴病（alveolar echinococcosis, AE）尚无有效药物治疗手段，迫切需要开发新型治疗药物。前期研究表明，HIV蛋白酶抑制剂（HIV protease inhibitors, HIV PIs）具有潜在抗寄生虫功能。本文旨在研究HIV PIs对Echinococcus multilocularis（Emu）DNA损伤诱导样1蛋白（DNA damage inducible 1 protein, Ddi1）活性的影响。本研究通过构建真核表达重组载体pFastBac1-Emu Ddi1,在昆虫细胞系Sf9细胞中表达筛选出P1代和P2代，纯化出可溶性Ddi1重组蛋白，然后与目的蛋白的荧光底物检测纯化蛋白的活性，进一步检测沙奎那韦（saquinavir, SQV）、利托那韦（ritonavir, RTV）、安普那韦（amprenavir, APV）、阿扎那韦（atazanavir, ATV）、洛匹那韦（lopinavir, LPV）、福沙那韦（fosamprenavir, Fos）、达芦那韦（darunavir, DRV）等7种HIV PIs对Emu Ddi1重组蛋白活性的抑制能力。结果显示：细胞系内真核表达产物的酶活Km为1.422μmol·L-1,具有良好的亲和力和活性，最终筛到沙奎那韦对Ddi1蛋白二聚体活性位点的抑制率达67%,其IC50为34,说明沙奎那韦对Emu Ddi1重组蛋白酶活性具有良好的抑制效果。以上结果提示：沙奎那韦抑制重组蛋白Ddi1的活性，可能成为Ddi1的靶向药物，以期为替代药物或开发联合用药提供基础。
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