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普通白菜1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因BcrbcS的克隆及表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 刘东让 1 ; 侯喜林 2 ; 肖栋 3 ;

作者机构: 1.南京农业大学

2.中国农业科学院蔬菜花卉研究所

3.江苏现代园艺工程技术中心

关键词: 普通白菜;1;5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因;序列分析;QRT-PCR;原核表达

期刊名称: 中国蔬菜

ISSN:

年卷期: 2019 年 1 期

页码: 20-25

摘要: 利用RACE技术,从普通白菜抗霜霉病品种苏州青叶片克隆到1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基(ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit,BcrbcS)基因的全长cDNA序列.采用qRT-PCR分析该基因在普通白菜不同组织的表达模式.利用SDS-PAGE技术分析了该基因的原核表达特征.序列分析结果表明,BcrbcS基因的cDNA序列全长为733bp,其中开放阅读框长度为543bp,共编码181个氨基酸,分子质量为20.3*10^3Da,理论等电点为8.23.氨基酸同源系统进化分析表明,普通白菜BcrbcS基因与同科植物的进化关系相近.实时定量分析结果表明,BcrbcS基因在普通白菜叶中表达最强;在SA和NaCl处理下,BcrbcS基因表达量均在处理24h后达到峰值.原核表达载体经IPTG诱导表达出分子质量约为20*10^3Da的融合蛋白.

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