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具有中和活性的鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王怡平 1 ; 张忠伟 2 ; 蒲路莎; 赵丽丽; 陈洪岩;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室

2.吉林省松原市宁江区畜牧业管理局

关键词： 鸭肠炎病毒;单克隆抗体;中和活性

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2019 年 8 期

页码： 977-982

摘要： 为制备抗鸭肠炎病毒(DEV)的单克隆抗体(MAb)并对其生物学活性进行鉴定,本研究采用蔗糖密度梯度离心法提纯DEV鸭胚成纤维细胞适应毒,以此作为抗原免疫BALB/c小鼠,随后取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,有限稀释法克隆杂交瘤细胞株,经间接ELISA筛选,获得了1株稳定分泌抗DEV MAb的杂交瘤细胞株2E3.鉴定结果显示,该MAb为Ig M亚类,ELISA效价可达到1∶10~5以上;间接免疫荧光试验(IFA)中MAb可与细胞中增殖的DEV结合,Western-blot试验中MAb不与变性病毒蛋白作用,表明该MAb可能是构象表位的单抗;病毒中和试验表明,该MAb具有较强的病毒中和活性.上述结果表明,本试验获得的一株具有DEV中和活性的MAb杂交瘤细胞株为建立DEV的检测方法和DEV的相关研究提供了材料支持.

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