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牛呼吸道合胞体病毒RT-LAMP检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李家伟 1 ; 王建科 2 ; 张淑琴; 张加力; 郭利;

作者机构： 1.吉林农业大学研究生院

2.中国农业科学院特产研究所特种动物分子生物学重点实验室

关键词： 牛呼吸道合胞体病毒;环介导等温扩增技术;检测方法

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2019 年 5 期

页码： 867-871

摘要： 牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)是引起牛呼吸道疾病的一种病毒性病原体.本研究建立一种利用环介导等温扩增技术(RT-LAMP)快速检测BRSV的新的方法,针对BRSV N基因(GeneBank:AF054668.1)设计4对特异性LAMP引物,每组引物特异性识别靶基因序列上4个独立区域,利用扩增靶DNA的Bst2.0 DNA聚合酶,63℃恒温水浴50 min完成病毒检测,使用钙黄绿素检测荧光目视和琼脂糖凝胶电泳方法,同时对牛的其他主要病毒进行特异性检测,结果证明特异性好.该RT-LAMP检测方法的灵敏度达到BRSV模板稀释的10-6倍,可成功检测到临床样本中的BRSV基因组,为BRSV的临床检测提供了一种快速的试验手段,更适合BRS的诊断和临床现场快速检测.

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