文献类型： 中文期刊
作者： 汪羚 1 ; 杨娟 2 ; 李斌; 尚梦珂; 高坤; 侯成香; 唐旭东; 郭锡杰;
作者机构： 1.江苏科技大学生物技术学院
2.中国农业科学院蚕业研究所
关键词： 家蚕;质型多角体病毒;实时荧光定量PCR;原核表达
期刊名称： 蚕业科学
ISSN： 0257-4799
年卷期： 2019 年 1 期
页码： 46-53
摘要： 在感染家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrovirus,BmCPV)的家蚕中肠组织中发现一个表达量明显下调的未知蛋白LOC101742613,与棉铃虫(Helicoverpa armigera)的未知蛋白LOC110378285的序列一致性为51%.利用PCR技术克隆获得了编码该蛋白质的cDNA,其序列全长为1 114 bp,最大开放阅读框(ORF)为993 bp,编码的蛋白质由330个氨基酸残基组成,预测蛋白质分子质量为36.6 kD,等电点为4.31.实时荧光定量PCR分析发现目的基因主要在家蚕的脂肪体、精巢、卵巢和头部组织中表达,且家蚕中肠感染BmCPV后48 h和72 h其mRNA的表达量显著下调,分别为对照组的7.3%和2.1%.通过构建重组表达载体pET28a/BGIBMGA014203对去掉信号肽的目的蛋白进行原核表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析发现重组蛋白主要在包涵体中,分子质量约为37 kD.研究结果为进一步阐明目的基因的生物学功能奠定了基础.
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