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棉花黄萎病菌gDNA提取方法和不同单孢的RAPD分析

文献类型： 中文期刊

作者： 刘学堂 1 ; 郭金城 1 ; 张元恩 2 ; 宋晓轩 1 ; 孙君灵 1 ; 李为 3 ;

作者机构： 1.中国农业科学院棉花研究所农业部棉花遗传改良重点实验室

2.中国农业大学植物科技学院植病系

3.河南农业大学

关键词： 棉花黄萎病菌;DNA提取;单孢;RAPD分析

期刊名称： 河南农业大学学报

ISSN： 1000-2340

年卷期： 1999 年 33 卷 03 期

页码： 274-278

收录情况： CSCD

摘要： 选用棉花黄萎病菌代表性的菌系 Ｖａ（ Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ａｌｂｏａｔｒｕｍ 的一个菌株） 和 Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ 的落叶型菌系 Ｖ Ｄ－８ ， Ｔ９ 及非落叶型菌系 Ｊｙ（ 致病力较强的泾阳菌系） ，以 Ｋｅ（ 致病力较弱的库尔勒菌系） 作为实验对象，研究了 Ｃ Ｔ Ａ Ｂ 和氯化苄２ 种提取方法的优劣．结果表明： Ｃ Ｔ Ａ Ｂ 法比氯化苄法提取的 Ｄ Ｎ Ａ 片段长（５０ｋｂ） ，纯度高（ Ｏ Ｄ２６０／ Ｏ Ｄ２８０ ＝ １５６） ，且稳定、无污染，适合于常规分子生物学研究；该提取方法中 Ｅ Ｄ Ｔ Ａ， Ｎａ Ｃｌ 和β巯基乙醇的最佳配比为１０ ｍ ｍｏｌ，１４ ｍｏｌ 和２ ％ ．利用提取的５ 个菌系的ｇ Ｄ Ｎ Ａ 对 Ｏ Ｐ Ｙ 及 Ｏ Ｐ Ｂ 两组引物进行了筛选，１６ 个引物可以扩增出多态性的谱带．利用引物对 Ｖａ 菌系的４ 个单孢进行的 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 分析，从分子水平证明了不同单孢之间发生变异的可能性．

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