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山羊环鸟苷酸-腺苷酸合成酶的原核表达及其酶活性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 韦雨松 1 ; 张艳 2 ; 田慧慧 1 ; 翟军军 2 ; 陈国华 1 ; 房永祥 1 ; 景志忠 1 ; 屈雷 2 ; 米晓云 3 ; 何小兵 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室农业农村部兽医公共卫生重点实验室

2.榆林学院生命科学学院

3.新疆畜牧科学院兽医研究所新疆动物疫病研究重点实验室

关键词: 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶;环鸟苷酸-腺苷酸;原核表达;蛋白纯化;酶活性

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2024 年 008 期

页码: 1096-1102

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了研究山羊环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(gcGAS)的生物学功能,通过构建含gcGAS基因的pET28a-gcGAS原核表达载体,在Rosetta (DE3)表达菌中进行表达,经纯化获得了纯度较高的重组gcGAS蛋白,并测定其酶促活性。结果显示,在优化表达条件下,实现了重组gcGAS蛋白的可溶性表达,其能以ATP和GTP为底物合成了第二信使分子2′3′-c GAMP。结论:原核表达的可溶性重组gcGAS蛋白具有生物酶催化活性,这为后续gcGAS介导的抗病毒天然免疫机制研究及其应用开发奠定了一定的基础。

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