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DHV-Ⅰ和DEV双重荧光定量PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 陈肖韩 1 ; 刘海燕 1 ; 苏世博 1 ; 赵丽丽 1 ; 陈洪岩 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室

关键词： Ⅰ型鸭肝炎病毒;鸭肠炎病毒;双重荧光定量

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN：

年卷期： 2021 年 002 期

页码： 169-175

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立快速特异的能够鉴别诊断DHV-I和DEV的荧光定量PCR方法,根据NCBI中I型鸭肝炎病毒和鸭肠炎病毒的保守序列,采用Beacon Designer 7.5软件,设计了2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针。接着,对反应条件进行优化,验证其特异性及敏感性。结果,该方法特异性好,对鹅细小病毒、番鸭细小病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、鸭坦布苏病毒、禽网状内皮增生病毒、禽呼肠弧病毒、减蛋综合征病毒、鸭甲肝病毒3型9种病毒检测,均无荧光信号。而且其灵敏度高,对DHV-I和DEV的最小检出量均为200拷贝。利用所建立的荧光定量PCR方法对江苏徐州采集的166份肛拭子进行检测,检出I型鸭肝炎病毒13份（阳性率为7.8%）,鸭肠炎病毒75份（阳性率为45%）。上述结果表明,本研究建立了灵敏度高特异性强的DHV-I和DEV双重荧光定量PCR方法。

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