文献类型： 中文期刊

作者： 陈景超 ¹ ; 李志玲 ¹ ; 崔海兰 ¹ ; 于海燕 ¹ ; 马宇菲 ² ; 李香菊 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院植物保护研究所

2.集宁师范学院

关键词： 磷酸果糖激酶;牛筋草;多克隆抗体;草甘膦;抗药性

期刊名称： 植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2024 年 50 卷 005 期

页码： 199-204

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 抗草甘膦牛筋草中磷酸果糖激酶(PFK)与靶标酶5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)的含量存在线性关系,是牛筋草对草甘膦产生抗性的指示蛋白之一.为实现抗草甘膦牛筋草的快速鉴定,本研究克隆了牛筋草PFK全长基因,构建原核表达载体,并免疫大兔最终获得多克隆抗体,进一步对抗体的特异性和灵敏性进行了检测,并用该抗体对抗性牛筋草进行了检测鉴定.结果发现,PFK基因全长1 656 bp,编码551个氨基酸,该基因的原核表达载体pGEX-4T-1-PFK经诱导后表达的蛋白大小为45 kD,蛋白纯化后浓度为3.5 mg/mL.制备的多克隆抗体能特异地识别牛筋草PFK蛋白,稀释512 000倍后仍可检测到抗原,并能够准确鉴定PFK不同表达量的抗性牛筋草.结果表明:本研究制备的PFK多克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点,可鉴定EPSPS 过表达的抗草甘膦牛筋草,这为牛筋草对草甘膦抗药性的快速鉴定提供了实用工具.