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PEI介导外源基因进入植物细胞的瞬时表达

文献类型： 中文期刊

作者： 李颖 1 ; 崔海信 1 ; 宋瑜 1 ; 李瑶 1 ; 黄金丽 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所

关键词： 聚乙烯亚胺;纳米基因载体;植物细胞;瞬时表达;拟南芥

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2009 年 42 卷 06 期

页码： 1918-1923

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】医学方面的大量研究证实,聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)作为一种新型阳离子多聚物基因载体可以吸附和浓缩DNA,通过与细胞膜亲和粘附和细胞吞噬作用运载外源基因进入细胞并实现表达。本实验研究旨在探索PEI作为非病毒基因载体介导外源基因进入植物细胞并获得瞬时表达的可能性。【方法】制备PEI/DNA复合物,利用凝胶阻滞分析PEI与DNA的结合情况,采用电子显微镜观察PEI/DNA复合物的形态。以绿色荧光蛋白基因为报告基因研究不同N/P比条件下PEI/DNA复合物对拟南芥原生质体细胞的转化效率,并与PEG转化方法进行比较分析。【结果】PEI与DNA的质量比为5﹕1～1﹕4,PEI可以与DNA稳定结合,形成粒径约100～200nm的球形复合物。PEI/DNA复合物对拟南芥原生质体细胞的转化效率随其N/P比的增大而提高,N/P=5时PEI的转化效率达到最高且明显高于PEG介导的转化效率,N/P>5时转化效率反而下降,容易使细胞破碎和变形。【结论】PEI作为一种新型的外源基因运送载体对拟南芥原生质体细胞具有良好的介导基因转移效果。

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