您好，欢迎访问中国农业科学院 机构知识库！

全部

  • 全部
  • 标题
  • 学者
  • 机构
  • 关键词

高粱可溶性酸性转化酶基因(SAI-1)PCR克隆方法

文献类型： 中文期刊

作者： 钟海丽 1 ; 聂元冬 1 ; 王智 1 ; 顿宝庆 1 ; 李桂英 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院作物科学研究所

关键词： 高粱;可溶性酸性转化酶;PCR克隆方法

期刊名称： 植物遗传资源学报

ISSN： 1672-1810

年卷期： 2016 年 17 卷 01 期

页码： 177-182+188

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 可溶性酸性转化酶(SAI)是蔗糖代谢途径中的关键酶,对植物生长发育起着至关重要的调节作用,研究简捷快速克隆可溶性酸性转化酶基因方法,对于育种材料和品种资源的基因分型具有重要意义。本研究通过已知的高粱可溶性酸性转化酶基因序列及高粱基因组中该基因序列片段,设计引物,比较了分段克隆、基因全长克隆、巢式PCR克隆等方法克隆高粱SAI-1基因的效果,结果表明,直接扩增全长,扩增产物极其不稳定且扩增产物纯化、连接,转化后得不到阳性克隆;采用均等分段克隆,前半段扩增产物纯化、连接转化后得不到阳性克隆,但后半段克隆成功;针对高粱基因组信息中SAI-1基因上游的未知序列部分设计引物,进行单独克隆(635 bp),再单独克隆其其余序列,两段序列拼接后得到SAI-1基因全长。序列分析发现,SAI-1前段635 bp的扩增片段GC含量高达69.6%,而其后GC含量急剧下降至30%以下,所以推测全长克隆、均等片段克隆以及巢式PCR克隆失败的原因可能是SAI-1基因中GC分布不均匀,克隆高粱SAI-1基因较为适宜的方法为利用2对引物进行不均等分段扩增克隆,前段PCR退火温度较后段高1℃。该方法将为其他研究人员提供有益参考。

  • 相关文献

[1]高粱可溶性酸性转化酶基因(SAI_I)PCR克隆方法. 钟海丽,聂元冬,王智,顿宝庆,李桂英. 2016

[2]高粱可溶性酸性转化酶基因(SAI-1)PCR克隆方法. 钟海丽,聂元冬,王智,顿宝庆,李桂英. 2015

[3]甜高粱可溶性酸性转化酶基因(SAI-1)cDNA全长克隆及表达分析. 聂元冬,刘洋,顿宝庆,王智,钟海丽. 2014

[4]甜高粱可溶性酸性转化酶基因(SAI - 1) cDNA 全长克隆及表达分析. 聂元冬,刘洋,顿宝庆,王智,钟海丽,李桂英. 2014

[5]可溶性酸性转化酶SAI基因在不同甘蔗基因型中表达分析. 杨翠芳,潘有强,魏源文,邓智年,吕维莉,李杨瑞. 2013

[6]甜高粱SAI-1基因全长克隆及表达分析. 聂元冬. 2013

[7]甜高粱SAI-1基因等位变异及其生物学效应研究. 钟海丽. 2015

[8]甜高梁茎秆糖分积累关键酶基因克隆及功能标记开发. 刘洋. 2009

[9]高粱资源材料茎秆含糖量等相关性状的关联定位分析. 吕芃. 2014

[10]玉米ZmSNAC1和高粱SbSNAC1基因的克隆与功能分析. 卢敏. 2013

[11]加工过程对高粱功效成分与功能活性的影响. 吴丽. 2012

[12]高粱幼苗水分胁迫诱导表达差异cDNA的研究. 张宏一. 2005

[13]23份国内高粱种质资源饲草利用价值评价. LIU Hong-liang,刘宏亮,HAN Yun-Hua,韩云华,WANG Xian-Guo,王显国,WU Fei-Fei,吴菲菲,NING Ya-Ming,宁亚明. 2016

[14]质子,同步辐射(超软x)和γ射线辐照高粱的生物效应研究. 唐掌雄,巩玲华. 1997

[15]种植密度和施肥对“茅梁1号”产量及其相关性状的影响. 陆秀娟,李祥栋,任明见,石明. 2016

[16]高粱在肉鸡中表观代谢能和氨基酸表观代谢率预测模型的研究. 沈兆艳,郭军,聂伟,呙于明. 2017

[17]饲料新秀-高丹草. 杨俊卿. 2000

[18]密度和施肥对茅粱1号高粱光合速率、产量及品质的影响. 董亚兵,彭亚姝,李魁印,田山君,徐如宏,吴传玺,任明见. 2021

[19]高粱转录因子基因SbSBP15的克隆及表达分析. 方远鹏,蒋君梅,杜巧丽,陈美晴,裴会敏,屈志广,任明见,谢鑫. 2020

[20]高粱的杂种优势与同工酶. 张维强,张纯慎,唐秀芝,李兴桥,苏益民. 1981

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：中国农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台