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同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 王淑菁 1 ; 林欢 1 ; 付瑞 1 ; 李晓波 1 ; 王吉 1 ; 岳秉飞 1 ; 贺争鸣 1 ;

作者机构： 1.中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

关键词： 小鼠微小病毒;小鼠细小病毒;荧光定量PCR

期刊名称： 实验动物科学

ISSN： 1006-6179

年卷期： 2018 年 04 期

页码： 29-32

摘要： 目的建立同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR方法,并进行初步应用。方法比对NCBI上发表的MVM和MPV基因组序列,设计1对引物和探针,可同时检测MVM和MPV。考察MVM-MPV引物探针的特异性和灵敏度,并对178份清洁级小鼠粪便DNA样本进行检测。结果 MVM-MPV荧光定量PCR方法最佳线性范围为10~9~10~4拷贝/μL,标准曲线的线性关系良好,R2值可达0.99,灵敏度为101拷贝/μL,特异性强。应用MVM-MPV探针对178份小鼠粪便DNA检测,结果为2份阳性样本,经MVM、MPV特异性探针鉴定,2份阳性样本均为MPV感染。阳性样本经全基因组测序后与NCBI网站上MPV(NC_001630.1)序列比对,一致率为96%。结论建立的MVM-MPV荧光定量PCR方法,能够有效快速地同时检出小鼠细小病毒和小鼠微小病毒。

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