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日本血吸虫胞外囊泡的提取、鉴定及对人肝星状细胞影响的初探

文献类型： 中文期刊

作者： 钟昊然 1 ; 朱丹霖 1 ; 董博文 1 ; 陆珂 1 ; 李浩 1 ; 傅志强 1 ; 刘金明 1 ; 金亚美 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院上海兽医研究所

关键词： 日本血吸虫;胞外囊泡;MICRORNA;人肝星状细胞

期刊名称： 复旦学报（自然科学版）

ISSN：

年卷期： 2024 年 003 期

页码： 398-404,414

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在探讨日本血吸虫(Schistosoma japonicum)胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)的提取方法及特性.本研究利用尺寸排阻法收集Sj EVs,通过透射电镜、蛋白质谱对Sj EVs的形态学、蛋白谱进行解析并对鉴定到的蛋白进行生物信息学分析.将PKH67绿色荧光标记的Sj EVs与人肝星状细胞LX-2共孵育,观察细胞摄取Sj EVs的情况,并对细胞中虫源miRNAs及细胞内纤维化因子进行检测,初步探讨Sj EVs对肝星状细胞的影响.结果表明:Sj EVs呈圆形或椭圆形囊泡结构,内含EVs标志蛋白.生物信息学分析结果显示,Sj EVs蛋白可能与细胞进程、代谢等途径密切相关.Sj EVs与人肝星状细胞LX-2共孵育结果显示,LX-2细胞可成功摄取Sj EVs,且定量反转录PCR(RT-qPCR)结果显示LX-2细胞中部分虫源miRNAs显著升高,纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原纤维α1(Collagen typeⅠalpha 1,Col1α1)和Ⅲ型胶原纤维α1(Collagen typeⅢalpha 1,Col3α1)极显著升高,提示肝星状细胞活化.综上,本研究为解析Sj EVs在宿主肝纤维化中的作用提供了依据,为进一步探究Sj EVs的潜在功能奠定了基础.

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