文献类型： 中文期刊

作者： 陈国梁 ¹ ; 郭爱民 ¹ ; 张少华 ¹ ; 梁盼红 ¹ ; 李艳萍 ¹ ; 王立群 ¹ ; 刘婷丽 ¹ ; 白雪 ² ; 骆学农 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

2.吉林大学人兽共患病研究所

关键词： 猪;4种绦虫蚴;多重PCR;鉴别诊断

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 006 期

页码： 496-501

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的建立一种多重聚合酶链式反应（multiplex polymerase chain reaction, mPCR）方法,用于快速鉴别猪囊尾蚴等4种猪的绦虫蚴。方法比较猪带绦虫（Taenia solium）、亚洲带绦虫（Taenia asiatica）、细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus）和泡状带绦虫（Taenia hydatigena）的线粒体基因组,选取tRNA-Val、tRNA-Ala、tRNA-Asp和nad1基因作为分子检测靶标,设计4条种特异性上游引物（TaF、EgF、ThF、和TsF）和1条下游通用引物（TR）,通过优化反应条件和体系,建立了在一个PCR体系中即可完成对4种猪绦虫蚴的快速鉴别的mPCR方法。结果 4种猪绦虫蚴的特异性PCR引物等比例混合后,在退火温度为50℃的条件下,该mPCR方法可同时扩增出C.cellulosae、T.asiatica、E.granulosus和C.tenuicollis的特异性基因片段,其大小分别为478 bp、710 bp、619 bp和542 bp。PCR产物测序后经BLAST比对,与同种虫体的基因序列相似性在99%以上。结论本研究建立的mPCR方法具有很高的种间特异性,并且可通过扩增片段的大小对4种猪绦虫蚴进行快速、准确的鉴别。