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过表达和干扰PRKD1基因对牛成骨细胞分化的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 赵峂 1 ; 王亚慧 2 ; 吴天弋 2 ; 高晨 2 ; 高霄霄 1 ; 张路培 2 ; 高会江 2 ; 李俊雅 2 ;

作者机构： 1.青岛农业大学动物科技学院

2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

关键词： 牛;PRKD1;成骨细胞;成骨分化

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年 56 卷 007 期

页码： 3188-3198

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在探究肉牛胴体胸深性状重要候选基因蛋白激酶D1(PRKD1)基因对牛成骨细胞分化的调控作用.本研究以妊娠3月龄华西牛胎儿肋骨来源成骨细胞为体外模型,根据PRKD1基因序列信息,分别构建合成了过表达PRKD1质粒(pPRKD1)和PRKD1 siRNA(siPRKD1),并将其转染牛成骨细胞并对其进行诱导分化;在分化第4天时,采用RT-qPCR和免疫印迹试验检测成骨分化关键效应基因(RUNX2、SP7、SPP1、COL Ⅰ)的表达量;在分化第7天时,检测ALP活性;在分化第21天时,用茜素红钙结节染色法检测成骨细胞成骨能力.以上所有试验均设立3个生物学重复,并于组内设立3次组内重复.结果表明,过表达PRKD1后,SP7和COL Ⅰ的mRNA和蛋白表达量显著提高(P<0.01),RUNX2和SPP1则未产生显著性变化.过表达PRKD1引起成骨细胞ALP活性显著升高(P<0.01),矿化结节显著增多(P<0.01),而干扰PRKD1则反之.综上,PRKD1基因显著影响牛肋骨成骨细胞的分化和成骨功能,研究结果为进一步解析PRKD1基因调控牛胴体胸深性状的作用机制提供理论依据.

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