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柑橘半胱氨酸蛋白酶基因CsCysP的分离、亚细胞定位及表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 张军 1 ; 陈娇 1 ; 张凌云 1 ; 朱世平 1 ; 闫树堂 1 ; 钟广炎 2 ;

作者机构: 1.西南大学园艺园林学院/中国农业科学院柑桔研究所

2.广东省农业科学院果树研究所

关键词: 柑橘;半胱氨酸蛋白酶;逆境;基因表达

期刊名称: 园艺学报

ISSN: 0513-353X

年卷期: 2014 年 41 卷 04 期

页码: 621-630

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以‘奥林达’夏橙[Citrus sinensis(L.)‘Olinda’]为材料,采用RT-PCR结合RACE技术从果萼离层中分离到1个半胱氨酸蛋白酶类基因,命名为CsCysP(GenBank登录号:KJ093387)。该基因的cDNA全长为1 485 bp,开放阅读框(ORF)为1 083 bp,推测可编码360个氨基酸残基的多肽。其基因组序列与cDNA比对后显示有3个内含子。分析发现,CsCysP属于papain-like(木瓜蛋白酶,C1A)家族的半胱氨酸蛋白酶,与拟南芥、大豆、烟草、杨树等的同源蛋白有73%~83%的相似性。亚细胞定位结果显示CsCysP蛋白定位在细胞壁上。qRT-PCR结果表明CsCysP在老叶、成熟果实果萼离层和花中的表达量明显高于幼苗的根、茎、叶。CsCysP的表达被脱落酸、高盐和PEG6000诱导,低温、乙烯、芸薹素内酯、水杨酸和甲基茉莉酸可抑制其表达。利用基因工程手段获得了柑橘过表达CsCysP的5个转基因株系。

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