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红麻HcMS1基因的克隆、表达与功能分析

文献类型: 中文期刊

作者: 陈文涛 1 ; 潘根 1 ; 唐慧娟 1 ; 常丽 1 ; 李德芳 1 ; 赵立宁 1 ; 陈安国 1 ; 李建军 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院麻类研究所

关键词: 红麻;雄性不育;HcMS1基因;生物信息学分析;表达分析;烟草转化

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2021 年 36 卷 004 期

页码: 64-74

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为挖掘红麻雄性不育核基因,解释红麻花蕾败育的分子机理,通过分析转录组数据,利用同源克隆的方法从红麻花药中克隆出拟南芥MALE STERILITY1(MS1)的同源不育基因,并命名为HcMS1基因.利用生物信息学方法对HcMS1蛋白进行结构、理化性质及亲缘关系等分析,并通过qRT-PCR分析HcMS1基因在红麻不育系、保持系不同时期的表达水平;构建过表达载体,利用叶盘法转化本氏烟草并对转基因烟草进行表型观察.HcMS1基因序列开放阅读框(ORF)为1950 bp,编码649个氨基酸.生物信息学分析显示,HcMS1蛋白为亲水蛋白,定位在细胞核上且含有典型PHD-finger结构域,没有信号肽和跨膜区结构,与陆地棉MS1蛋白亲缘关系最近,其次为木槿MS1蛋白.qRT-PCR结果表明,HcMS1基因的表达量在保持系和不育系中均呈现先上升、后下降的趋势,且在红麻花蕾的四分体至单核期表达量最高,这与拟南芥中MS1基因表达模式一致;另外在保持系中基因的表达水平显著高于不育系,推测红麻败育与HcMS1基因的低量表达相关.通过遗传转化试验发现,HcMS1转基因烟草株型较矮,花萼大小不一,花筒长度缩短,并出现自交不结实的现象,说明红麻HcMS1基因的异源表达有影响本氏烟草正常育性的功能.从红麻花药中成功克隆出核不育相关基因HcMS1,并对其进行功能分析,为后续红麻雄性不育育种工作提供了一定的理论依据与基础.

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