文献类型： 中文期刊

作者： 李伉 ¹ ; 陈思颍 ² ; 孙雅雯 ² ; 冷璇 ² ; 王栋 ² ; 崔凯 ¹ ; 庞云渭 ² ;

作者机构： 1.青岛农业大学动物科技学院

2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

关键词： 甜菜碱;猪;胚胎;孤雌激活;m⁶A修饰

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年 56 卷 008 期

页码： 3826-3836

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在探究甜菜碱对猪孤雌激活胚胎体外发育能力的影响。本研究于屠宰场采集猪离体卵巢，在实验室抽取卵丘-卵母细胞复合体，经体外成熟、孤雌激活后，在添加不同浓度甜菜碱(0、0.25、0.5、1.0 mmol·L^-1)的培养液中进行体外培养，48 h统计卵裂率，168 h统计囊胚率，筛选最佳添加浓度；利用Hoechst 33342染色统计囊胚细胞数，实时荧光定量PCR检测囊胚全能性基因（OCT4、NANOG和SOX2）表达水平；检测囊胚活性氧（reactive oxygen species, ROS）和谷胱甘肽（glutathione, GSH）水平；利用免疫荧光染色检测2-cell期、4-cell期、8-cell期、桑椹胚期和囊胚期各阶段胚胎的m⁶A水平，并检测囊胚m⁶A甲基化转移酶及m⁶A去甲基化转移酶相关基因表达水平。各组试验均至少重复3次。结果表明，0.25和0.5 mmol·L^-1 甜菜碱处理组孤雌激活囊胚率显著高于对照组和1.0 mmol·L^-1 处理组（P<0.05）,其中0.5 mmol·L^-1组最高。与对照组相比，0.5 mmol·L^-1组囊胚细胞数极显著增加（P<0.01）,全能性基因OCT4、NANOG和SOX2的mRNA表达显著上调（P<0.05）,囊胚ROS水平极显著降低（P<0.01）,GSH水平极其显著增加（P<0.000 1）;0.5 mmol·L^-1组8-cell期、桑椹胚期和囊胚期胚胎的m⁶A修饰水平和m⁶A甲基化转移酶相关基因（WTAP、METTL3和METT14）的表达水平显著高于对照组（P<0.05）,但m⁶A去甲基化转移酶相关基因（ALKBH5和FTO）的表达无显著变化。综上所述，在体外培养基中添加0.5 mmol·L^-1 甜菜碱通过增强胚胎抗氧化能力、上调m⁶A修饰水平，显著提高猪孤雌激活胚胎体外发育能力并改善胚胎质量。