文献类型： 中文期刊

作者： 李倩倩 ¹ ; 高鹏程 ² ; 葛家振 ² ; 吴晓妮 ² ; 田彤彤 ² ; 许健 ² ; 郝华芳 ² ; 郑福英 ² ; 蔺国珍 ¹ ; 储岳峰 ² ;

作者机构： 1.西北民族大学生命科学与工程学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室

关键词： 绵羊肺炎支原体;Mo pdhD;免疫原性;间接ELISA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年 004 期

页码： 439-447

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在筛选出绵羊肺炎支原体（Mo）特异性抗原靶标，并建立间接ELISA方法。利用Pulldown实验结合LC-MS技术分析，筛选Mo的抗原靶标并进行表达纯化，使用Western-blot试验分析纯化蛋白的反应原性；免疫小鼠，分析蛋白免疫原性、制备免疫血清，建立基于靶标蛋白的间接ELISA方法，并对其进行性能评价。结果显示，筛选出的Mo pdhD蛋白的分子质量为71 ku，该蛋白与稀释度为1∶4 000的Mo阳性血清仍可以发生反应，免疫小鼠血清效价可达1∶102 400，建立的间接ELISA方法不与绵羊痘病例等的阳性血清产生交叉反应，批间及批内重复的变异系数均在12%以内，与IHA法符合率可达82.5%。可见，Mo pdhD蛋白具有良好的反应原性与免疫原性，建立的间接ELISA方法性能良好，可用于Mo的血清学诊断，为进一步研发Mo ELISA抗体检测试剂盒奠定了基础。