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Pina和Pinb融合基因表达载体的构建及其在硬粒小麦中的转化

文献类型： 中文期刊

作者： 李根英 1 ; 夏兰芹 1 ; 夏先春 1 ; 何中虎 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院作物科学研究所国家小麦改良中心/国家基因资源与遗传改良重大科学工程

关键词： Pina和Pinb基因融合表达载体;硬粒小麦;幼胚培养;基因转化

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2007 年 40 卷 07 期

页码： 1315-1323

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】构建Pina、Pinb融合基因表达载体,验证Pina和Pinb基因的功能,为利用转基因技术改良小麦籽粒质地提供理论依据和基础材料。【方法】以软质小麦京411作为Pina和Pinb基因的供体,将Pina、Pinb基因融合后,与基础质粒pG4AB上的Ω和poly(A)等增强基因表达的调控序列及pAHC25上的Ubiqutin启动子和bar基因表达盒相连接,构建Pina、Pinb融合基因植物高效表达载体。利用基因枪转化硬粒小麦幼胚,并对硬粒小麦幼胚再生体系进行探索。【结果】在构建完成Pina、Pinb融合基因植物高效表达载体pFUBPaPb的基础上,转化硬粒小麦幼胚16000多枚,经biolaphos筛选、PCR鉴定和斑点杂交鉴定,得到再生植株2390株,35株为阳性植株。共得到T1代籽粒356粒,对种子量较多的16个单株籽粒进行蛋白表达分析,有2株检测到基因表达产物,其籽粒SKCS硬度值比受体品种分别降低了10和12。培养基SD2适于硬粒小麦幼胚愈伤组织的诱导,MS+8mg·L-1玉米素可获得较为理想的再生频率。【结论】Pina和Pinb的共同表达降低了硬粒小麦籽粒硬度,具有软化籽粒质地的功能。

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