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粘虫类钙粘蛋白基因的克隆、序列分析及时空表达

文献类型： 中文期刊

作者： 江幸福 1 ; 罗礼智 1 ; 胡毅 1 ; 张蕾 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

关键词： 粘虫;类钙粘蛋白基因;基因克隆;序列分析;蛋白结构;时空表达

期刊名称： 昆虫学报

ISSN： 0454-6296

年卷期： 2011 年 54 卷 10 期

页码： 1094-1103

收录情况： 北大核心

摘要： 昆虫中肠膜类钙粘蛋白(cadherin-like protein,CLP)是苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)毒素的重要受体之一,与Bt毒素的杀虫作用机制以及昆虫对Bt毒素的抗性等密切相关。本研究应用RT-PCR和RACE技术,克隆了迁飞性重要害虫粘虫Mythimna separata类钙粘蛋白基因全长cDNA序列(命名为Msclp,GenBank登录号为JF951432),全长5642bp,编码1757个氨基酸,推导的氨基酸序列具有昆虫类钙粘蛋白的特征结构,包括1个信号肽、1个前蛋白区、12个钙粘蛋白重复、1个近膜区、1个跨膜区和1个胞质区。预测的分子量和等电点分别为196.786kD和4.5。该蛋白与同科的烟夜蛾Helicoverpa assulta、烟芽夜蛾Heliothis virescens、棉铃虫Helicoverpaarmigera及甜菜夜蛾Spodoptera exigua的类钙粘蛋白亲缘关系最近,氨基酸序列一致性分别为61.77%,61.66%,61.26%和58.14%。荧光定量RT-PCR分析表明,该类钙粘蛋白基因在不同龄期的粘虫幼虫中表达量差异极显著(P<0.01),其中4龄幼虫相对表达量最高,但与3龄、6龄幼虫并没有显著性差异;1和2龄幼虫表达量最低;表达部位主要在粘虫中肠,在中肠以外的虫体其他部位表达量极低。这些结果对于揭示转Bt作物对非靶标、迁飞性粘虫的杀虫作用机制以及评价其潜在的对Bt毒素抗性机制等奠定了基础。

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