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猪带绦虫Ddi1-like蛋白的真核表达及其抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 何伟 1 ; 殷静 1 ; 岳生赟 1 ; 刘仲藜 1 ; 王帅 1 ; 才学鹏 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

关键词： 绦虫;Ddi1-like蛋白;真核表达;蛋白酶

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2017 年 05 期

页码： 582-586

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了对DNA损伤诱导蛋白1(Ddi1-like)基因功能进行研究,本研究参考GeneDB中猪带绦虫基因组注释信息,通过设计5′和3′端特异性引物,利用cDNA末端快速扩增法(RACE)获得全长cDNA,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达;将纯化后的Ddi1-like重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗血清。结果,成功利用RACE获得Ddi1-like基因的全长cDNA序列;在真核表达系统中,绦虫上的Ddi1-like重组蛋白获得表达;SDS-PAGE和Western-blot分析表明,获得重组蛋白即为Ddi1-like蛋白;免疫后获得抗血清,其效价达到1∶12 800。上述结果为后续研究Ddi1-like蛋白的酶切活性研究提供了基础。

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