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粘虫生物钟timeless基因的克隆及时空和昼夜表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 冀佳悦 1 ; 张蕾 1 ; 程云霞 1 ; 罗礼智 1 ; 仵均祥 1 ; 江幸福 1 ;

作者机构: 1.西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室;中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

关键词: 粘虫;永恒蛋白基因;克隆;时空及昼夜表达

期刊名称: 植物保护学报

ISSN: 0577-7518

年卷期: 2018 年 04 期

页码: 670-678

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为明确生物钟timeless基因对粘虫Mythimna separata迁飞、交配等周期性活动的调节作用,利用PCR技术克隆了粘虫timeless基因,命名为Mstim,采用生物信息方法分析其序列特征,使用实时荧光定量PCR技术检测该基因在不同发育阶段、组织及昼夜的表达特征。结果表明,Mstim的c DNA全长为3 132 bp,编码1 043个氨基酸,其预测的蛋白质Ms TIM分子量为117 k D,等电点5.14,具有timeless保守的PIS、NLS等结构域,与甜菜夜蛾Spodoptera exigua及棉铃虫Helicoverpa armigera的氨基酸序列相似性高达97%。荧光定量PCR结果显示成虫期的Mstim表达量最高,卵期和蛹期次之,6龄幼虫的表达量最低;在雌、雄蛾中均以触角及头部中的表达量较高,飞行肌、足及生殖腺中的表达量较低。粘虫雌、雄蛾触角中Mstim的昼夜表达模式相似,均为光期表达量低于暗期,光期5 h的表达量最低,光期末期逐渐升高,至暗期后3 h达到最高值,暗期末期表达量开始下降。说明Mstim基因在粘虫中的表达不仅具有发育时期和组织的时空特异性,而且表现出明显的昼夜特性,推测其可能参与粘虫生长发育和迁飞与生殖等行为、生理节律的调节。

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