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农杆菌介导高粱成熟胚遗传转化获得耐草甘膦植株

文献类型: 中文期刊

作者: 郝曜山 1 ; 王晓清 1 ; 张欢欢 1 ; 王亦学 1 ; 孙毅 1 ; 段永红 1 ; 杜建中 1 ; 周福平 1 ;

作者机构: 1.山西省农业科学院高粱研究所高粱遗传与种质创新山西省重点实验室;山西省农业科学院生物技术研究中心;山西农业大学农学院

关键词: 高粱;成熟胚;麦草畏;转基因;农杆菌介导;草甘膦

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2020 年 05 期

页码: 905-912

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用萌动的成熟胚作外植体进行基因转化,可有效提高高粱转基因材料选育的效率。为了建立并完善以高粱萌动种胚作为外植体的遗传转化体系,本研究以高粱材料Is-623为转化受体,质粒pM3301UbiSpCP4为外源基因供体,采用农杆菌介导法进行遗传转化,并对转化的关键因素进行分析。结果表明,麦草畏(dicamba)诱导高粱萌动的成熟胚产生愈伤组织适宜浓度约为5 mg·L~(-1);农杆菌侵染时间为2 h时遗传转化效率较高;经筛选共获得301块抗性愈伤组织,75个转化事件,经PCR、Southern blotting杂交分析、CP4-EPSPS蛋白检测试纸条检测及田间草甘膦耐性鉴定,最终获得草甘膦耐性等级1级株系6株,耐性等级2级株系3株的转基因高粱株系。本研究初步建立了以高粱萌动种胚作为外植体的遗传转化体系,为高粱遗传转化体系的研究和应用奠定了基础。

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