文献类型： 中文期刊
作者： 孙晶晶 1 ; 曹小安 1 ; 吴锦艳 1 ; 尹双辉 1 ; 周建华 1 ; 兰喜 1 ; 李学瑞 1 ; 刘永生 1 ; 尚佑军 1 ;
作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室
关键词： 布鲁氏菌;免疫磁珠;qPCR方法;敏感性
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2020 年 010 期
页码： 1243-1248
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为建立高效、快速和准确检测布鲁氏菌病原的免疫磁珠qPCR方法,本研究根据GenBank已经发表的布鲁氏菌流产株BRS 19 ku外膜蛋白(Omp19)基因组序列来设计qPCR方法所需要的引物和探针,利用免疫磁珠富集浓缩样品中少量的布鲁氏菌病原,建立了布鲁氏菌免疫磁珠qPCR检测方法.采用qPCR方法对免疫磁珠分离的布鲁氏菌的敏感性、特异性、稳定性及临床应用进行了研究.结果显示,免疫磁珠qPCR方法检测布鲁氏菌的最低检测限为1*10~3CFU/mL.该方法可以扩增不同种型布鲁氏菌,对其他细菌没有发生交叉反应.该方法的批内和批间的变异系数均低于10%,具有较高稳定性.免疫磁珠qPCR方法与常规qPCR的符合率为94.74%,具有良好的吻合性.上述结果表明,本研究建立的免疫磁珠qPCR方法检测布鲁氏菌具有较高的敏感性、特异性和稳定性,为布鲁氏菌病的准确诊断检测和流行病学调查提供技术支撑.
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