文献类型： 中文期刊

作者： 申世凯 ¹ ; 曾婷 ¹ ; 乔兴华 ² ; 陈力 ² ; 任杰群 ³ ; 周彦 ¹ ;

作者机构： 1.西南大学柑桔研究所国家柑桔工程技术研究中心

2.重庆市万州区植物保护与果树技术推广站

3.重庆三峡农业科学院

关键词： 柑橘;柑橘衰退病毒;反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条;快速检测

期刊名称： 果树学报

ISSN：

年卷期： 2023 年 012 期

页码： 2652-2660

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】柑橘衰退病由柑橘衰退病毒（citrus tristeza virus,CTV）引起，是一种世界性的重要柑橘病害。为实现CTV的田间快速检测，建立一种准确、快速且可视化的检测方法。【方法】以CTV外壳蛋白（CP）的保守区域为靶标，设计3对特异性引物和探针，通过引物筛选，以及优化引物浓度、反应时间和反应温度等条件，建立CTV的反转录-重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条（RT-RPA-LFD）快速检测方法，明确其灵敏度，并用于田间疑似样品的检测。【结果】建立了CTV的RT-RPA-LFD检测方法：最佳检测引物为RPA-1F/R，对应探针为RPA-P，最佳反应条件为40℃，25 min，且与其他5种柑橘病毒无交叉反应。该方法的灵敏度是RT-PCR的100倍，最低可检测到2.12×101拷贝·μL-1的CTV核酸，与RT-qPCR相当。采用RT-RPA-LFD法在67份田间样品中检测出CTV阳性样品41份，与RT-PCR法检测结果一致。【结论】建立的CTV RT-RPA-LFD法具有操作简单、快速、结果可视等优点，适合基层植保工作者对田间样品开展快速检测。