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miR-376c-5p靶向PIK3CA对前体脂肪细胞脂肪沉积的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 宋湘怡 1 ; 曹行 1 ; 刘武军 1 ; 蒋琳 2 ;

作者机构： 1.新疆农业大学动物科学学院

2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

关键词： miR-376c-5p;PIK3CA;脂肪沉积

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年 56 卷 010 期

页码： 4914-4924

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在通过探究miR-376c-5p与PIK3CA的靶向关系,揭示miR-376c-5p对3T3-L1前体脂肪细胞分化的影响,探索与脂肪分化相关的miR-376c-5p在脂肪生长分化过程中的作用及可能的调控机制.本课题组前期挑选了相同饲养条件下健康的6只3岁巴什拜羊(大尾型)和6只野生盘羊×巴什拜羊F2代绵羊(小尾型)收集其尾部脂肪组织,通过对尾部脂肪的测序数据分析结果,筛选出差异表达的miR-376c-5p.并构建miR-376c-5p mimic过表达载体进行转染,通过qPCR检测PIK3CA、成脂分化标志基因的表达情况;结合油红O染色和bodipy染色检测成脂能力.分析miR-376c-5p在不同物种中的保守性,利用生物信息学软件预测miR-376c-5p的靶基因PIK3CA及其之间的结合位点和双荧光素酶报告试验验证miR-376c-5p与PIK3CA之间的靶向关系.与mimic NC组相比,过表达miR-376c-5p后,qPCR结果显示分化成脂标志基因(PPARγ、ADIPOQ、AC AC A、FASN)的mRNA表达水平均极显著下调(P<0.001),油红O和Bodipy结果均显示,过表达miR-376c-5p后,脂滴生成减少,说明过表达miR-376c-5p抑制了 3T3-L1前体脂肪细胞的成脂分化.通过预测发现miR-376c-5p与PIK3CA 3'UTR区存在结合位点,双荧光素酶报告基因分析显示,过表达miR-376c-5p显著抑制了含有PIK3CA 3'UTR片段载体的荧光活性(P<0.05);过表达miR376c-5p也会显著抑制候选靶基因PIK 3CA mRNA的表达量(P<0.05).以上结果说明miR-376c-5p可能通过靶向PIK3CA抑制脂肪生成,研究结果为miRNA在分子水平上的研究提供了一定的理论依据.

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