您好,欢迎访问中国农业科学院 机构知识库!

小麦原生质体高效转化体系的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 刘鑫 1 ; 魏学宁 2 ; 张学文 1 ; 张增艳 2 ;

作者机构: 1.湖南农业大学生物科学技术学院

2.中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部麦类生物学与遗传育种重点实验室

关键词: 小麦原生质体;核酸酶活性;原生质体转化效率;抗病相关基因;亚细胞定位

期刊名称: 植物遗传资源学报

ISSN: 1672-1810

年卷期: 2017 年 18 卷 01 期

页码: 117-124

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 植物原生质体广泛应用于植物基因功能研究中,包括瞬时基因表达、亚细胞定位、蛋白互作和蛋白活性分析等。当前,小麦基因的亚细胞定位和功能分析,大多利用模式植物拟南芥等异源的原生质体,易于造成研究结果的不准确。为避免这种情况,小麦原生质体制备及高效转化体系的建立与应用是必需的。在PEG介导的小麦原生质体转化过程中,原生质体分泌的核酸酶大量降解质粒DNA,转化效率的提高因此受到阻碍。为了建立小麦原生质体的高效转化体系,本文测试了抑制胞外核酸酶活性的因素和提高质粒DNA浓度等多个条件对转化效率的影响。结果表明,转化过程中加入双倍用量的质粒DNA进行转化,且始终保持低温环境(1℃)用以抑制核酸酶酶活性,可以使小麦原生质体的转化效率提高至85%。本文还将该系统成功地应用于2个小麦抗病相关蛋白的亚细胞定位研究,证明了该系统的高效性和实用性。该研究对未来相关研究有一定参考价值。

  • 相关文献

[1]小麦原生质体高效转化体系的建立. 刘鑫,魏学宁,张学文,张增艳. 2016

[2]甘蓝型油菜抗菌核病相关基因BNT19K4、BNF7A10、BNF5011的研究. 付浩,冀瑞琴,张学江,刘胜毅. 2007

[3]植物免疫蛋白制剂阿泰灵诱导小麦抗病增产效果及作用机制. 周强,邱德文,杨秀芬. 2017

[4]白粉病菌诱导的小麦表达序列标签(EST)研究(英). 骆蒙,孔秀英,姜涛,贾川,周荣华,贾继增. 2002

[5]基于BSR-Seq分析筛选Y1499条锈病抗性相关基因. 蒋雯婷,王光浩,郭欢,黄晨曦,张宏,吉万全. 2024

[6]PevD1诱导棉花对黄萎病抗性及作用机理. 杨秀芬. 2012

[7]基于抑制消减杂交方法的小麦抗白粉病相关基因表达谱. 骆蒙,孔秀英,霍纳新,周荣华,贾继增. 2002

[8]猪源日本脑炎病毒NS3蛋白在小鼠脑组织中的表达特性. 邓绪芳,史子学,王晓杜,邱亚峰,沈阳,邵东华,马志永. 2010

[9]鸭病毒性肝炎病毒RNA聚合酶在真核细胞中的表达及亚细胞定位. 王超,李传峰,陈宗艳,付玉志,吴润,刘光清. 2011

[10]陆地棉DGAT2基因全长cDNA的克隆与序列分析. 李兴丽,于霁雯,张金发,范术丽,宋美珍,黄双领,翟红红,喻树迅. 2010

[11]猪流感病毒聚合酶PB1蛋白亚细胞定位的研究. 王晓杜. 2009

[12]大丽轮枝菌蛋白激发子PevD1诱导棉花抗黄萎病及其作用机理. 卜冰武. 2013

[13]小麦抗白粉病近等基因系cDNA文库构建及抗病相关基因的全长cDNA克隆. 陈秀珍. 2004

[14]基于抑制差减杂交方法的小麦抗白粉病相关基因表达谱研究. 骆蒙. 2001

[15]小麦抗条锈病相关基因cDNA片段及Yr10候选基因的克隆. 李文凤. 2001

[16]棉花抗黄萎病基因GhERF的功能分析和抗黄萎病相关基因GhHRGP的转化研究. 翁宇. 2008

[17]马铃薯青枯病抗性相关基因的分离及其功能分析. 李广存. 2006

[18]水稻LOC_Os05g02754基因的分子表征. 王启钊,赵海军,李文旭,刘国振,舒庆尧. 2013

[19]大豆GmDRR与互作基因GmDIP1的亚细胞定位及原核表达. 杨蕊,禹国龙,沈岩茹,刘春燕,傅永福,辛大伟,陈庆山. 2016

[20]拟南芥SCBP60g蛋白的亚细胞定位及其功能研究. 万永青,李瑞丽,邹博,万东莉,王瑞刚,李国婧. 2013

作者其他论文 更多>>