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一种测定转基因作物中CaMV35S启动子甲基化水平的方法

文献类型： 中文期刊

作者： 黄春蒙 1 ; 谢家建 1 ; 杨继彦 1 ; 彭于发 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室

关键词： CaMV35S启动子;甲基化;转基因作物;HpyCH4Ⅳ;甲基化敏感内切酶定量PCR扩增(MSRE-qPCR)

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2018 年 07 期

页码： 1258-1264

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 来源于花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus)的CaMV35S启动子是目前商业化转基因作物中最常用的启动子,对其甲基化水平的测定是研究转基因沉默的重要内容之一。本研究通过甲基化敏感内切酶HpyCH4Ⅳ酶切和实时荧光定量PCR扩增技术,建立了CaMV35S启动子甲基化水平的快速测定方法。利用建立的方法分析了我国安徽省2017年市场的棉花(Gossypium hirsutum)种子,发现部分种子中CaMV35S启动子甲基化处于较高水平。本研究为实现转基因材料中CaMV35S启动子甲基化的快速高通量筛查提供了检测方法。基于相同的原理也可以建立其他转基因元件和DNA序列甲基化水平的快速检测方法。

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