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梨树腐烂病菌致病力缺陷突变体的筛选和侧翼序列分析

文献类型： 中文期刊

作者： 袁洪波 1 ; 侯珲 1 ; 周增强 1 ; 涂洪涛 1 ; 王丽 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院郑州果树研究所

关键词： 梨树腐烂病菌;突变体;致病力;侧翼序列

期刊名称： 果树学报

ISSN： 1009-9980

年卷期： 2021 年 011 期

页码： 1966-1974

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】从梨树腐烂病菌T-DNA插入突变体库中筛选鉴定致病缺陷突变体,并分离致病相关基因。【方法】利用农杆菌介导方法转化梨树腐烂病菌,获得504个T-DNA插入转化子,对其中250个转化子的致病力进行筛选。利用TAIL-PCR对致病力显著降低的突变体的T-DNA插入位点的侧翼序列进行扩增和分析。【结果】与野生型菌株相比,4个转化子（T8、T12、T43和T75）在梨果实和枝条上致病力显著降低。扩增获得T8、T43和T75的T-DNA插入位点的特异侧翼序列,测序后经Blast比对序列结果显示,转化子T8、T43和T75 T-DNA分别插在含MSF结构域的蛋白基因、Zds1基因和假定的谷氨酸合成酶基因。【结论】构建了农杆菌介导的梨树腐烂病菌T-DNA插入突变体库,从中筛选获得4个致病力缺陷的突变体,并分析了致病力缺陷突变体的T-DNA插入位点的侧翼序列,为下一步梨树腐烂病菌致病基因的克隆和功能研究奠定了基础。

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