文献类型： 中文期刊

作者： 徐小惠 ¹ ; 曾欣 ¹ ; 李锐 ¹ ; 冯金梅 ¹ ; 黄道超 ¹ ; 黄轶 ¹ ;

作者机构： 1.重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所//国家儿童健康与疾病临床医学研究中心//儿童发育疾病研究教育部重点实验室//儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地//儿童感染免疫重庆市重点实验室

关键词： NDUFA13缺陷;巨噬细胞;炎症因子;肝星状细胞;肝纤维化

期刊名称： 南方医科大学学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 004 期

页码： 529-535

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的探究肝细胞线粒体NDUFA13蛋白表达缺失在诱导小鼠肝脏纤维化发生中的作用及可能机制。方法以肝脏特异性NDUFA13杂合敲除小鼠品系(NDUFA13^fl/-;Alb-Cre)作为研究对象,以同窝NDUFA13^fl/fl小鼠作为对照,8只/组,进行长达两年的实验观察,分别在实验早期和晚期处死小鼠获取肝组织样本。采用HE染色、Masson染色观察不同时期小鼠的肝组织病理变化及纤维化表型。Western blot检测肝组织中NDUFA13蛋白表达水平。免疫荧光分析巨噬细胞标志物F4/80与转化生长因子TGF-β1、肿瘤坏死因子TNF-α与白介素IL-1β的表达。免疫组化分析肝星型细胞活化标志物α-SMA、基质金属蛋白酶MMP-9与基质金属蛋白酶组织抑制剂TIMP-1、胶原纤维Collagen-Ⅰ与Collagen-Ⅲ的表达情况。结果 HE染色、Masson染色发现4周龄NDUFA13^fl/-小鼠肝组织炎症浸润明显但未出现纤维化表型;2年龄NDUFA13^fl/-小鼠肝组织严重损伤且伴大量胶原纤维产生。Western Blot结果显示2年龄NDUFA13^fl/-小鼠肝组织中NDUFA13蛋白表达水平较对照小鼠明显降低（P<0.05）。免疫荧光与免疫组化结果显示,NDUFA13^fl/-小鼠肝组织中巨噬细胞F4/80聚集增多并伴随大量TGF-β1产生（P<0.05）,以及TNF-α、IL-1β等炎症因子大量分泌（P<0.05）;同时,α-SMA、Collagen-Ⅰ及Collagen-Ⅲ表达明显增多（P<0.05）,基质金属蛋白酶MMP-9表达降低（P<0.05）,而其抑制剂TIMP-1表达明显增加（P<0.05）。结论肝细胞线粒体NDUFA13蛋白缺陷能够诱导小鼠自发的慢性肝纤维化病理表型,可能与巨噬细胞/炎症因子信号诱导的肝星状细胞异常活化有关。