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单粒蔬菜种子DNA快速提取方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 杨帆 1 ; 武剑 2 ; 常立春 2 ; 张涛 1 ; 朱海峰 2 ; 梁建丽 2 ; 高杰 1 ; 王晓武 2 ;

作者机构: 1.新疆农业大学园艺学院

2.中国农业科学院蔬菜花卉研究所

关键词: 蔬菜种子;磁珠法DNA提取;KASP分子标记;实时荧光定量PCR

期刊名称: 中国蔬菜

ISSN: 1000-6346

年卷期: 2024 年 007 期

页码: 26-32

收录情况: 北大核心

摘要: 利用磁珠法对甘蓝、白菜、芥菜、洋葱、黄瓜、番茄、辣椒等7种形状、大小不同的蔬菜单粒种子和幼苗进行DNA提取,采用内参基因Actin进行实时荧光定量PCR评价DNA质量,利用KASP(kompetitive allele specific PCR)标记检验DNA质量是否达到KASP检测要求。结果显示,单粒种子磁珠法提取的各蔬菜DNA平均Ct值均处于19~24范围内。KASP检测进一步证实种子提取DNA的质量达到KASP标记分型的要求。综上所述,本研究建立了一种简单、经济、实用性强的单粒种子DNA提取方法,该方法对不同大小的蔬菜种子具有较好的稳定性,且大幅缩短了获得基因型数据的时间。

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